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研究者らがmRNAコロナワクチンから標準検査では検出されない残留DNAを発見

小児保健防衛機構が一部資金提供した新たな研究により、ファイザー社とモデルナ社のCOVID-19 mRNAワクチンから残留DNAが検出された。規制当局が推奨しワクチンメーカーが採用している現行の検査法は、DNA汚染を大幅に過小評価していると研究者らは指摘。より優れた高精度検査法が存在し、その採用を義務付けるべきだと主張している。
市販されているmRNA COVID-19ワクチンに関する新たな実験室分析により、最終製品にスパイクタンパク質遺伝子に関連する配列を含む残留DNA断片が残存していることが判明した。
研究者らによれば、これらのDNA断片は標準的な規制試験法では通常検出されない形態で存在している。
研究者らは、一般的に使用される品質管理試験では、RNA:DNAハイブリッド構造に結合したDNAを検出できないため、残留DNA総量を100倍以上過小評価する可能性があると結論付けた。
ケビン・マッカーナン、チャールズ・リクシー、ジェシカ・ローズ博士が執筆したプレプリントで発表された本研究では、未開封の「コールドチェーン対応」ファイザーおよびモデルナワクチンバイアルを複数の分析技術を用いて調査した。
研究の一部資金提供を行ったチルドレンズ・ヘルス・ディフェンスの最高科学責任者ブライアン・フッカー博士は、この種の遺伝コードが細胞膜を容易に通過するワクチンの脂質ナノ粒子内に存在することは「確かに危険だ」とザ・ディフェンダーに語った。
フッカー氏によれば、ワクチン設計時、スパイクタンパク質のコードは体内において標的部位で約2週間のみ発現するよう意図されていたという。
「しかし、この外来DNAは体内により容易に拡散し、エピソーム的に複製と発現を継続するため、人間を遺伝子組み換えスパイクタンパク質生産工場に変えてしまう」とフッカー氏は述べた。
フッカー氏は、この研究が広範な臨床所見の説明に役立つ可能性があると指摘した。「ワクチン接種を受けた患者の一部が、最後のCOVIDワクチン接種後最大2年間にわたりスパイクタンパク質を産生し続けていると報告されている。これには、この追加の外因性DNAが引き起こす挿入効果による様々な疾患(がんを含む)の影響すら含まれていない」
製造元は「残留DNAの存在を認識していたはず」
メディシナル・ゲノミクスの最高科学責任者兼創設者であるマッカーナン氏は、2023年にCOVID-19ワクチンにおけるDNA汚染への懸念を初めて提起した。当時、同氏の研究室がモデルナとファイザーのCOVID-19ワクチンをシーケンシングしたところ、残留DNAの存在が確認された。同氏はファイザーが規制当局に提出したデータからこの情報を削除したと非難している。
マッカーナン研究室がワクチンを検査したところ、ファイザー製ワクチンにはmRNAのみではなく、DNAプラスミド——細胞の染色体DNAとは異なる、小さな環状二本鎖DNA分子——も含まれていることが判明した。
マッカーナンは、mRNAワクチンを製造する際、研究所では「in vitro転写」と呼ばれるプロセスを用いて必要なRNA分子を生成すると説明した。
RNA分子を生産するため、科学者は目的のRNA配列の生成を誘発するDNAテンプレートを設計する。このシグナルを認識する酵素がDNAをRNAへ複製する。
しかし、適切に機能するためには、テンプレート内のDNAを増幅する必要がある。臨床試験では、ファイザーはPCR(ポリメラーゼ連鎖反応)を用いてDNAを増幅した。同社はこれを「プロセス1」と呼び、RNA製造用のクリーンなDNAを生成した。
しかしプロセス1は高コストだった。一般向けワクチンの大量生産のため、ファイザーはDNA増幅に別手法を用いる「プロセス2」を採用。プロセス2は安価で簡便だが、元のDNAに存在しなかった配列が混入するリスクを伴う。
マッカーナンはプロセス1からプロセス2へのこの切り替えを「おとり商法」と呼んだ。最近のサブスタック動画で彼は、この変更は「計画的な動き」だと述べた。
「彼らが構築したアッセイを見れば、その意図がわかる」と彼は述べた。「そして彼らの行動から、最初から常にプロセス2を使用する計画だったことがわかる」
製造業者にはこれらの配列を分解・除去する義務があり、このケースではデオキシリボヌクレアーゼ(DNase)と呼ばれる酵素を用いて実施された。
しかしプレプリント研究で、研究者らは調査した全事例において酵素が配列を完全に破壊しなかったと報告している。
「今回の新論文で、なぜ・どのようにDNAがモデルナとファイザーのバイアルに混入したかの理論を証明した」と共同著者のローズはザ・ディフェンダーに語った。「これまでに検査した全バイアルにDNAが存在する。これは世界中の複数の研究所で、様々な手法を用いて再現されている。そしてDNAは、プロセス2のスケールアップ工程の一部としてハイブリダイズされたRNA:DNAに由来する」
ローズ博士は付け加えた:
「これらのハイブリッドは、製造者がプロセス最終段階として残留DNAを除去するために選択した酵素によって分解されなかった。彼らはこの事実を認識していたはずだ。なぜなら、彼らが選んだ酵素がハイブリッドを分解しないことは業界内で周知の事実だからである。彼らの行為はスキャンダラスだ。」
規制当局は誤った安全基準とDNA断片検出ツールを使用
規制ガイドラインでは通常、残留DNAを1回投与あたり10ナノグラム以下に制限している。しかし著者らは、DNaseが全てのDNAを均等に分解しないことを指摘した。
サブスタックでマッカーナンは、10ナノグラム制限が時代遅れだと説明した。この基準は残留DNAが「裸のDNA」であり、急速に分解するという前提で設定されたためだ。しかしCOVID-19ワクチン中のDNAは脂質ナノ粒子に封入されているため、分解速度が遅い。
COVID-19ワクチンの安全性の問題は重量ではなくDNA断片の数に関係する——断片が多いほど、そのDNAが既存細胞に組み込まれるリスクが高まる。
一部のDNA配列は、タンパク質構築に用いられるDNAの遺伝情報を持つ対応するRNA転写産物とハイブリダイズする。著者らによれば、これらのRNA:DNAハイブリッドは、典型的な二本鎖DNAよりも「DNase I消化」に対して著しく耐性が高い。
スパイク遺伝子領域は大量にmRNAへ転写されるため、特にこうしたハイブリッドを形成しやすい。
製造業者はこの問題を認識しているにもかかわらず、規制試験では通常、「qPCRアッセイ」と呼ばれる特定のDNA配列を増幅・測定する単一のラボ技術に依存している。この手法はカナマイシン(KAN)耐性遺伝子のみを対象としており、このプラスミド領域は転写されず、DNase消化に極めて敏感である。
研究によれば、この手法は体系的な偏りを生む。最も破壊されやすいDNAが測定対象となる一方、より耐性のある領域はほとんど検出されないのだ。
サブスタックでマッカーナン博士は「これは意図的な設計だ」と指摘。「彼らが設計したアッセイは、検出しないように作られていた」
CHD上級研究員カール・ジャブロノウスキー氏は「規制当局は『ワクチンスポンサーの品質管理に単一のアッセイ標的のみを活用した』と述べた。品質を検証したわけでも、第三者が検証したわけでもない」と述べた。
この手法ゆえに、「ワクチンから利益を得る立場の者たちが検査を設計し、品質を検査した」とジャブロノウスキー氏は指摘する。「彼らは悪い結果が出にくい検査を選んだ。完全に使用可能で検証済みの代替手段が既にツールボックスにあったが、その結果は事業全体を停止させる可能性があった」
使用する検査法によってDNA濃度は100倍以上変動する
研究者らは、KAN領域だけでなく異なるプラスミド領域を標的とするqPCR検査を比較した。その結果、異なるプラスミド領域における測定DNA濃度に100倍を超える差異が認められた。
スパイクタンパク質を標的とする検査では、KAN遺伝子や他の部位を標的とする検査に比べて、一貫してはるかに多くの残留DNAが検出された。
蛍光測定法(蛍光光で標的物質を検出する別の検査法)では、全検査ワクチンロットにおいて、米国食品医薬品局(FDA)の推奨上限値を15~48倍上回るDNAレベルが示された。
著者らはRNA:DNAハイブリッドが不一致の原因であるかを検証し、その証拠を確認した。
さらに独立企業であるオックスフォード・ナノポア・テクノロジーズ社に長鎖DNA分子の存在を確認させた。著者らは「より長い分子は短い分子よりも宿主細胞で発現されやすい」と指摘している。
研究者らは、ワクチンで検出された残留DNAの多くが、現行製造ガイドラインで残留DNA除去に指定されている酵素に耐性を持つハイブリダイズド形態で存在し、使用された検査法では残留DNAを検出できない可能性が高いと結論付けた。
著者らは規制プロセスに疑問を呈し、変更を要求
著者らは、現行規制が単一のDNase感受性qPCR標的のみに依存していることは、mRNA治療薬中のDNA不純物を特定するのに不十分であると結論づけた。この手法の使用により、規制当局は「残留プラスミドDNAの総負荷を体系的に過小評価する」結果となった。
代わりに、彼らは規制当局に対し、RNase制御蛍光測定法、異なる領域における複数のqPCR標的検査、断片特性解析のためのシーケンシングを含む多手法アプローチを義務付けるよう推奨している。
また、DNAまたはRNAを分解する別の改変酵素であるDNase I-XTが、あらゆる部位の残留DNA除去に効果的であると述べた。
著者らは結論として、調査が必要だと主張する一連の疑問を提起した。
より包括的な手法が存在するにもかかわらず、規制当局がDNA汚染に対する他の優れた試験を義務付けない理由を問いただした。彼らは「modRNA-LNP治療薬における現行のDNA定量基準と製造管理の包括的な再評価」を求めた。
規制当局がCOVID-19検査において偽陰性を回避するため多標的PCR検査を要求している点は懸念されると彼らは述べた。しかしワクチン品質管理には単一標的検査を受け入れている——この対比は精査に値すると彼らは指摘する。
彼らはプロセス1からプロセス2への切り替え決定について調査を要求した。「これらの生物学的製剤は多くの管轄区域で義務付けられ(多くの場合免責付き)、数十億人に投与されたことを考慮すれば、品質管理とGMPへの注意は特定層を対象とする医薬品基準を超えていなければならない。これらの製品は高齢者、虚弱者、妊婦、乳児に普遍的に投与されたのだ」
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