HPVワクチン DNA汚染という安全上の問題

子宮頸がんワクチンは汚染されたDNAが混入しているって話、聞いたことがありませんか？

以下はそれについて書かれているサイトと機械翻訳です。

参考文献はサイトの方でご確認下さい。

http://www.i-sis.org.uk/DNA_contamination_of_HPV_vaccines.php

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規制カーペットの下で一掃されるべきではない深刻な安全上の問題。 ジョーカミンズ教授

ヒトパピローマウイルス（HPV）ワクチンのガーダシルがDNAに汚染されていることが最近判明した時、米国食品医薬品局（FDA）は、DNAは汚染物質ではなくワクチン生産の無害な副産物であると宣言しました。同意しません; 無関係のDNAは潜在的に有害です。 HPVワクチンの安全性と有効性は最初から物議を醸してきたことにも注意すべきです（[1] The HPV Vaccine Controversyとその他のシリーズの記事、 SiS 41を参照）。

ウイルス

HPVは、皮膚または粘膜のケラチノサイトでのみ増殖性感染症を引き起こします。既知のHPVの種類の大部分はほとんどの人に症状を引き起こさないが、他のものは子宮頸部、外陰部、膣、陰茎、口腔咽頭および肛門の癌につながることができる一方で、いくつかの種類はいぼを引き起こすことがあります。

最近、HPVは心血管疾患のリスク増加と関連しています。さらに、HPV 16および18の感染症は、のどのがんを発症するリスクの増加と強く関連しています。 2002年に世界中で推定561200の新しい癌症例（5.2％）がHPVによるものであり、HPVを癌の最も重要な感染原因の1つとしており、子宮頸癌は世界で2番目に多い癌である。 2008年には、推定529,000の子宮頸癌の新規症例と274000の死亡があった。発展途上国での死亡の85％以上が女性の全癌の13％を占めています[2]。

ウイルスゲノム

ＨＰＶゲノムは、タンパク質をコードする８個の遺伝子および調節遺伝子を有する非タンパク質コード領域からなる。これらの遺伝子は、ウイルス発生において初期機能と後期機能として区別される。初期遺伝子には、癌発生のための癌遺伝子と共にウイルス複製および転写に関与するものが含まれる。後期遺伝子はウイルスキャプシドの２つの構造タンパク質Ｌ１およびＬ２をコードする。 HPVは、何らかの方法で損傷を受けると、子宮頸部上皮の基底細胞に感染します。ウイルスゲノムは、基底細胞においてエピソーム（独立して複製する核ミクロ染色体）として確立される。エピソームは細胞の染色体と並行して複製し、ウイルス粒子を形成する。完全なウイルス粒子は上皮の最も外側の細胞にあり、ウイルスは細胞が上皮から剥がれ落ちるにつれて広がる。いくつかのウイルスタンパク質は癌タンパク質として機能し、上皮細胞を前癌状態に変換する。しかしながら、ＨＰＶ感染は必要であるが癌形成には十分ではない。高悪性度病変および癌では、エピソームは細胞染色体に組み込まれています。組込みは、癌タンパク質の産生を制御するウイルス転写調節タンパク質を破壊し、それらの継続的かつ増強された産生をもたらす[3]（組換え子宮頸癌ワクチン、 SiS 29）。ヒト染色体へのＨＰＶの組込みはランダムではない。 HPVの癌遺伝子E5または構造タンパク質L2に相同な染色体領域の組込みホットスポットを伴う[4]。子宮頸癌の女性は、染色体断片として、または独立したエピソームとして完全にまたは部分的に組み込まれたウイルス染色体を有することが見出されている。部分的に統合されたHPVは、癌を持つ女性に最も多く見られましたが、完全なウイルス統合は頻度の約半分であり、エピソーム型はまれです。癌を引き起こす組込みは、E1 / E2領域でHPV染色体を破壊し、その領域の喪失を引き起こす。これは次に癌遺伝子Ｅ６およびＥ７の制御の喪失をもたらす。 E7癌遺伝子は、宿主細胞の網膜芽腫遺伝子（癌抑制遺伝子）を不活性化するタンパク質を産生し、それによって癌を促進します[5]。（網膜芽細胞腫は、網膜芽細胞腫遺伝子の喪失によって引き起こされる遺伝性の眼の癌です。）主な教訓は、HPV DNAの断片化や切断が宿主細胞の癌進行における重要な要素であるということです。

遺伝子転写

ウイルス遺伝子は複雑な転写パターンを有する。初期の遺伝子すべてに対して単一のプロモーターがある。初期プロモーターは大きなプレメッセンジャーＲＮＡの産生を開始し、そこからエクソンおよびイントロンを含むメッセージがスプライスされて各初期タンパク質を生成する。他のウイルスプロモーターは、エクソンおよびイントロンも含み、メッセンジャーＲＮＡのタンパク質への翻訳の前に同様にスプライスされる構造タンパク質Ｌ１およびＬ２のためのプレメッセンジャーの産生を開始する。大きなプレメッセンジャーＲＮＡ転写物については早期および後期ポリアデニル化（ポリＡ）シグナルがある。 HPVの遺伝子発現は宿主細胞の発生状態と密接に関連しています[6]。

マイクロＲＮＡは、非常に小さい（鎖中に約２２ヌクレオチド）細胞の非コード調節遺伝子産物である。マイクロRNAは多くのヒトの癌で変化しており、1つはHPV肛門癌で有意に上昇しています[7]。マイクロRNAのクラスターがHPV頭頸部癌と関連していることがわかった[8]。ＨＰＶ癌の自然史は遺伝子転写の複雑なパターンを示し、マイクロＲＮＡはＨＰＶ癌の発症に関与している。

HPVワクチン

HPVワクチンは2006年以来世界的に普及してきました。2つのワクチンが商品化されました：メルク(MSD)製ガーダシルとグラクソスミスクライン製サーバリックス。それらは子宮頸癌を予防的だが、既存の感染を治癒せず、そしてＨＰＶに対する免疫を達成するためのＬ１ウイルス様粒子に基づいている。Ｌ１タンパク質は自己組織化して、ヒト免疫系を活性化して抗体を形成する粒子のような空のウイルスを形成することができる。ワクチンの標的となるHPVは、「高リスク」の16型と18型、および「低リスク」の6型と11型です。2つの市販のHPVワクチンは、どちらも実験室で遺伝子組み換え（GM）微生物を使用して作られます。ガーダシルは、4つのサブユニットタンパク質の混合物を含むウイルスのような粒子を含むため、4種類すべてのHPVから保護され、4価ワクチンと呼ばれます。 4種類のL1タンパク質はGMパン酵母を使用して製造されています。サーバリックスはHPV 16型および18型を防御し、二価ワクチンであり、培養昆虫細胞中でGMバキュロウイルス（土壌由来昆虫ウイルス）を使用して製造されています[9]。

ガーダシル

このワクチンは、4種類のヒトパピローマウイルス（HPV）のそれぞれに1種類ずつの、4種類の一価バルク吸着製品（MBAP）から構成されています。各ＭＢＡＰ中の活性成分は、組換えＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅにおいて産生されるそのＨＰＶ型のための組換えメジャーキャプシド（Ｌ１）タンパク質からなるウイルス様粒子（ＶＬＰ）である。 pGAL110酵母発現ベクターを4つすべてのHPVL1タンパク質に使用した。Ｌ１遺伝子は直接クローニングプロトコルにより誘導された。しかしながら、ＨＰＶ１１Ｌ１のコード配列は、酵母における良好なＶＬＰ発現を支持するＨＰＶ６Ｌ１ヌクレオチド配列に基づいて合成的に再構築された。ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）を用いて、酵母遺伝子GAL1-GAL10プロモーターおよび転写終結およびポリアデニル化のための酵母ADH1ターミネーター（ADH1t）を含む酵母発現ベクターpGAL110にL1遺伝子をサブクローニングした。 4種類のHPVタイプのそれぞれについて、pGAL110関連酵母発現ベクターを使用して、組換えS. cerevisiaeを形質転換しました[10]。

ガーダシルDNA汚染

2011年に、ガーダシルは、米国、オーストラリア、ニュージーランド、スペイン、フランス、ポーランドで販売されている多くのワクチンのすべてにおいて、組換えHPV DNAに汚染されていることがわかりました。同定されたＤＮＡフラグメントの１つは、ＨＰＶキャプシドタンパク質Ｌ１からの遺伝子フラグメントであった［１１］。 13歳の少女、Sane Vaxは、ガーダシル接種の2年後にHPV DNAを含む血液を含んでいたことがわかった[12]。他のＤＮＡ混入物は、多くの混入ワクチンサンプルにおいて具体的に同定されていないが、おそらくワクチンタンパク質を産生するために使用される遺伝子改変酵母由来のＤＮＡフラグメントである。 FDAとワクチン製造業者は以前ガーダシルがDNAを含んでいないと彼らが後で彼らの調子を変えたと主張していて、そして今ワクチン中のDNA HPV L1遺伝子が汚染物質ではないと主張しています、しかしそれはワクチン生産の通常の結果です。残りのDNA断片は安全であると推定されます[13]。世界保健機関（WHO）は以前に200塩基対より短いDNA断片は安全であると推定されるべきであると主張していた[14]。メルク(MSD)、FDA、およびWHOは、ワクチン中のDNA汚染物質はいかなる証拠もなく安全であると推定されるべきであると主張するために仲裁を終えているようです。

L1遺伝子断片などのガーダシル中のDNA混入物、およびワクチンの製造に使用される合成L1遺伝子に隣接するGAL1-GAL10プロモーターおよびADH1ターミネーターなどの可能性のある酵母DNA断片は、ガーダシルワクチン接種の犠牲者に脅威を与えないかもしれない。しかし、それらが実験的な証拠や評価なしにヒトの予防接種に対して安全であると推定することは全く受け入れられません。実際、短いＤＮＡ断片をヒトゲノムに組み込むことができる。ワクチンの製造に使用される酵母は、細菌からヒトまでのほとんどの生物で使用されている小さな調節RNAを持っていませんが、細胞増殖または損傷および存在下での増殖に関与するペプチドを特定する22の短いDNA配列を含む247の小さなオープンリーディングフレームを含みます。 DNA損傷および複製停止少なくとも1つの酵母遺伝子産物は癌抑制遺伝子p53を不活性化し、そのようにして多細胞生物における癌を促進します[15]。Ｌ１遺伝子および／または酵母遺伝子の組み込みは、身体の多数の組織において癌を獲得する可能性を高め得る。血球、肝細胞、脾臓マクロファージおよびT細胞において摂取されたDNAが哺乳動物のDNAと共有結合することが長年知られており[16]、循環する核酸を介した水平遺伝子導入および組換えが現在よく知られている[17]。（循環核酸による相互通信、 ＳｉＳ ４２）。

Cervarix

サーバリックスは、活性成分として、ＨＰＶタイプ１６および１８の組換えＣ末端切断型（短縮型）主要キャプシドＬ１タンパク質を含有する。ＨＰＶ − １６およびＨＰＶ − １８のＬ１タンパク質は、組換えバキュロウイルス発現系およびトリコプルシア由来の昆虫細胞株Ｈｉ − ５Ｒｉｘ４４４６を用いて別々に産生される。 L1タンパク質を抽出し、さらに精製した後、それらはVLPとして別々に組み立てられます。各ＨＰＶ型のＶＬＰは、水酸化アルミニウムおよび３ − Ｏ−デスアシル−４−モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）からなるＡＳＯ４アジュバント系を用いて処方される。ＭＰＬ免疫刺激剤は、グラム陰性菌Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｍｉｎｎｅｓｏｔａ Ｒ５９５株のリポ多糖の無毒化誘導体である。宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）、ＤＮＡ、および感染性組換えバキュロウイルスＤＮＡは、調製工程において除去される可能性のある不純物である。脂質や炭水化物などの他の不純物はごく微量しか存在しません[18]。

サーバリックス DNAの汚染？

サーバリックスの製造業者は、ワクチンがバキュロウイルスベクターまたは昆虫細胞由来のDNAまたは他の産物で汚染されていないと主張している。完全なゲノム配列が決定されているバキュロウイルス、 オートグラファ・カリフォルニカ （Autographa californica）ヌクレオポリヘドロウイルス（AcMNPV）は、棒状のヌクレオカプシドに包まれた約130キロベースの環状二本鎖スーパーコイルDNAゲノムを有する。これらのヌクレオカプシドは縦方向に伸長することができ、したがってウイルスゲノムは外来ＤＮＡの大量挿入に効果的に適応することができる。ＡｃＭＮＰＶゲノムへの外来遺伝子のそのような挿入は、バキュロウイルス発現ベクターの産生をもたらした。バキュロウイルス遺伝子プロモーターの制御下で昆虫細胞中で発現させることができる目的の外来遺伝子を含むように遺伝子改変された組換えウイルス［１９］。バキュロウイルスは、ヒト細胞に感染しそしてその中で生存する。バキュロウイルスは、ヒトのものを含む広範な脊椎動物細胞において遺伝子発現を媒介し［２０］、そして多数のバキュロウイルス遺伝子がヒト細胞において発現される［２１、２２］。バキュロウイルスは、アポトーシスを予防し、それによって癌細胞の進行を促進する2つの遺伝子を含む[23]。バキュロウイルスは、宿主の免疫防御機構との干渉を含めて、8つのウイルス標的および64個の細胞標的を有するマイクロRNAをコードする小さいDNA遺伝子を含む[24]。バキュロウイルスベクターＤＮＡがヒトにとって有害な遺伝子を保有するという明らかな証拠がある。バキュロウイルスおよび昆虫細胞由来のタンパク質と共にDNAおよびRNAがサーバリックスワクチンを汚染しないようにすることが不可欠です。

最後に

ＨＰＶワクチンのＤＮＡ汚染は深刻な問題であり、そしてＦＤＡによって主張されているように組換えワクチン製造の正常なまたは許容できる結果ではない。 FDAの誤った主張は、ガーダシルだけでなくサーバリックスにも深刻な問題を投げかけました。真に独立した機関が緊急に2つのワクチン中の汚染DNAとRNAの含有量に関する研究を行うことを要求されています。

最初に公開された記事12/09/12