7/25 Mon
研究室に入ったとき、誰もいなくて驚いた。Ｇさん、Ｎさん、Ｍはラットの世話に行っていたようだ。そして、ボスは私用のため不在だと聞いた。３人はさっさと消え、再び一人になった。研究室の吸引力はボスから発せられるものだと感じた。メソッドをまとめる気にはならず、図書館で本を借りたり、カップ麺を買いに行ったりした。研究室で一人で飯を食べ、ネットを遊んでいると、Ｕさんがやって来た。そのまま、一緒にアメーバピグやfacebookで遊んだ。Ｕさんはfacebookを始めた。さっさと帰るつもりだったが、結局19時半に下校。
7/26 Tue
14時過ぎに着き、メソッドをまとめた。MAOとTPHがほぼ完成。次はGDHと思ったときに、ボスから召還され、実験について打ち合わせ。明日から3日間で、GABA-T、GAD、GSの活性測定練習を行う。コントロールの脳を使い、反応時間や酵素濃度を変えて実験を行う。内標にはメチオニンスルホンを用いる。濃度計算がイマイチ分からなかったので、ボスから教えていただいた。そして、目的の濃度になるように試薬を調整。ボスからは「息が合わない」と言われ、ショックだった。まだ実験室や実験操作に慣れていないのはさておき、気配りが足りないと反省した。謙虚かつ快活になりたいのとは裏腹に、自信のなさからテンションが下がって声も小さくなった。その上、気も利かないなんて、社会人として情けない。もっと堂々としていたいなぁ。テンションが低いまま、Ｇさん、Ｕさんと一緒にラーメン屋へ。
7/27 Wed
今日からやっと実験だというのに、また寝坊。13時半過ぎに行き、まずGさんUさんとラットの世話。そして、試験監督から戻ったボスと一緒に、GABA-Tの活性測定。ボスと一緒にやると、自分の未熟さを痛感して恥ずかしい。プライドなんかない。分からないのに分かった振りして後で困るよりも、一時の恥ずかしさを気にせず、どんどん質問しよう。今までは酵素反応終了後のエッペンチューブだけ氷に突き刺していたが、試薬たちも全て同じようにする方がいいと学んだ。そして、氷ボックスごと持って、遠心機やインキュベーターのところへ行く。さて、今回は最初の実験、というか測定の練習なので、ちゃんと測れているかどうかを、反応時間やエンザイムソースの希釈率を変えて確認する。反応時間を変えるバージョンは、0分、10分、20分、40分、80分を2本ずつで、計10本。希釈率を変えるバージョンは、×2、×4、×8をそれぞれ0分と40分反応させるのを2本ずつだから、計12本。合計22本のエッペンチューブで酵素反応させる。10分のチューブの反応を止めるところまではボスと一緒だったが、その後は一人でやった。30秒毎にTCAを加えていくという時間との闘いなので、緊張する。その後、遠心分離した上澄みを、40μLずつ2つのエッペンチューブに分けた。これをpico tag化してHPLCにかけるわけだが、1本は予備である。合計を44本のうち、半分を乾固させて本日は終了。乾固機には40本しか入らないから、いっぺんに全部は無理。乾固にかかる時間は2時間くらいだから、午後から実験を始めた俺が2回も乾固機をまわしたら、帰りが夜中になってしまう。だから、残り半分は明日の午前にでも乾固させることにした。
7/28 Thu
午前から行って乾固機をまわすつもりが、やはり午後からになってしまった。今日はGADの測定だが、1回分の試薬量を算出していなかったので、ボスとMさんが話している時間をありがたく利用して検討。話が終わる頃、ちょうど試薬量を決定して、ボスと打ち合わせ。内標であるメチオニンスルホンをどれくらい入れるかとか。結局、昨日と同じ比率、つまりバッファーの1/100量を加えることにした。基本的に流れは同じだから、今日からはもう一人で実験できる。張り切って、最初に昨日の残りの乾固をしようと思ったら、乾固機が動かない。ボスに相談してお任せすると、どうやらベアリングが錆びていたようで、クレ556みたいのを使ったら直ったらしい。昨日のGABA-Tでは、エンザイムソース＝脳の水ホモジネートだから、単に基質溶液と水ホモジネートを混合すれば酵素反応が始まった。でも、GADの場合、水ホモジネートに色々混ぜて、遠心分離した上澄みがエンザイムソースとなる。だから昨日よりも手順は少し複雑で、やや手間取った。ただし、ボスとの打ち合わせで、反応時間を変えるバージョンは40分までに、希釈率を変えるバージョンは×4までに変更したので、チューブが16本に減って、少し楽になった。乾固させるときも32本だから一度にまわすことができる。乾固を待っているうちに、ボスも含め皆帰ってしまった。俺はピグでのチャットなどで時間をつぶした。
7/29 Fri