成体マウスに存在する胎児組織細胞は、いざという時に活躍するために待機する。

STAP細胞の理解を深めようとする人は、STAP細胞の自己増殖能について考えることになります。
小保方氏は、STAP細胞は2-3代位までしか生存できないとの観察結果でした。

一方、ES細胞は、多能性を秘めたまま自己増殖が可能であるのですが、このES並みの能力を、他の生体由来細胞で得ることは難しいことを私たちは知ります。
多能性と自己複製の二つの能力を共に持つのが、胎児期の細胞の特徴の幹細胞です。
そして、多能性を秘めた自己増殖能は、胎児細胞の特徴であり、STAP細胞では、この能力はありません。

丹羽先生のグループ(筆頭著者は、Hesham Nasser)Cell Death Discov. 2020; 6: 63. に以下の論文を書いています。
PMCID: PMC7378060  PMID: 32714570
Establishment of bone marrow-derived M-CSF receptor-dependent self-renewing macrophages

一般的な成体マウスのマクロファージは、骨髄で作られているのですが、マクロファージの種類の一部に、骨髄由来でない細胞があることがわかってきました。
その異なる分画のマクロファージは、胎児期細胞(卵黄嚢や胎児肝臓)に由来しています。

そして興味あることに、成体で維持されているこの胎児期由来細胞は、胎児期細胞と同様の自己増殖能を有しているそうです。
つまり、骨髄由来のマクロファージと、胎児細胞由来のマクロファージの両種が、それぞれに準備されており、成体マウスで機能するための出番を待っています。

さらに、いくつかの研究で、骨髄由来の単球でも、培養をくりかえすことにより自己複製マクロファージに分化させることができることが示されています。

丹羽先生たちは、上記の論文で、自己複製能力を持つ骨髄由来マクロファージを誘導し、その細胞の特徴を示しました。
自己複製能骨髄由来マクロファージは、マクロファージコロニー刺激因子(M-CSF)を用いた長期培養法で得ました。
ES細胞の自己複製に活躍する転写因子の中で、Krüppel様因子2(KLF2)が、この系でもM-CSF刺激により強くアップレギュレートされ、一方、転写因子MafBはダウンレギュレーションしました。
KLF2のノックダウンすると、細胞周期の停止と自己複製マクロファージの増殖が減少しました。

この種類の細胞は、生体の危機に際して、蘇り、活躍する機能を秘めて待機しているということでしょう。
この待機しているマクロファージ分画の機能は、成体マウスが生きるために続き、かつ、一生、維持されます。
(もちろん、ヒトでも、機能しているわけです)

丹羽先生は、STAP検証実験でも、初期化遺伝子発現を証明した大型の多型性の細胞を得てますよね。




この記事を読んだため息さんが新記事文章を書いてます。

>小保方氏は、STAP細胞は2-3代位までしか生存できないとの観察結果でした。

確かに悪文ですね。


小保方氏によると、STAP細胞は2-3代位までしか生存できないとの観察結果でした。

でしょうけど、意味は通じるし、わざわざ、大学の先生が、こうした事で、揚げ足を取るのはみっともないですね。あちらの人は、何か正すべき順序が狂ってます。デタラメ科学は平気なのに、やり過ごしてもよいことに噛みつきます。ため息さんのやるべき事は、論文に対するコメントであるべきです。

この論文に接して、丹羽先生の検証実験を思い出すスキルなんて、ため息さんにはありません。学者としての勘も鋭さも全くないです。学とみ子に張り付いて揚げ足を取りたいなら、もう少し工夫したらどうですか?

順序が狂ってること平気なんですね。

科学と信念を履き違えています。

ため息さんです。論文を読みなれた学者なら、日本語サマリーが紹介された論文はすぐ読んでみようと思いますが、ため息はそうした方ではありません。さあ、どんな論評するのでしょう?

ため息さんは、いつでも、論文は正しく読める人であるとパフォーマンスしてます。今まで、おかしな読み方をしてたことは忘れちゃうんですね。

>(紹介内容が正しいかどうか検討したくないのでわからない)STAP細胞とは関係ない論文のようですね。




なんだか、今まで我慢していた自制の念が外れて、文章を書き始めたplusさんのようです。
学とみ子の文章が、plusさんの論評魂を刺激するんだと思います。
plusさんの中では、思い上がった奴をやり込めてる俺は、大したもんだナ!なんでしょか?
それで、plusさんが満たされれば、学とみ子も役に立つ人になれたのでしょう。

理解しようにも理解できない苛立ちを感じる人たちは、いらだちを抱え維持することで、いつか本物の知識が自身のものになることが多いものです。

そちらの仲間同士で、お互いに相づちをうち、誉めあって、評論を楽しんでください。
いつか、本物のSTAP論評ができますように・・・。


さて、学とみ子は前に進みます。
以下が、丹羽先生の検証実験の写真です。



ヘキスト染色


上記の図表を説明したのが、以下の英文文章です。
まず、上記図の左下 bの表です。
HCl で処理した肝細胞の Oct3/4 蛋白陽性率(抗体で染色して蛋白の存在を確認する方法)は、2/38 (5%)であり、HCl で処理していない肝細胞1/14(7%)並みでした。つまり、陰性コントロールと変わりませんでした。

一方、ATP(酸性液)で処理した肝細胞のOct3/4 蛋白陽性率は19/97 (20%)でした。 
このOct3/4 蛋白陽性率は、ES細胞並みでした。

この結果は、ATP(酸性液)で処理した肝細胞は初期化蛋白のOct3/4 を合成したことを意味します。
この実験では、Oct3/4 を合成する能力のある胚細胞のmorulaを陽性のコントロールに用いています。

cの写真をご覧ください。
注目すべきは、ATP(酸性液)で処理した肝細胞のOct3/4 蛋白陽性細胞は、核が大きく凝集塊の中央に位置しています。
その大きな(エース)細胞の周りを囲むように、小さな核のOct3/4 蛋白陰性細胞がとりかこんでいる所見です。

つまり、これらの凝集塊は、生存に向けてお互いにサポートしあう関係にあるのかも・・・(ここは英文にはない。)
成体内の一部の特殊部隊は、細胞危機の際、初期化現象を起こして、細胞の危機的条件を乗り越えるように働く可能性を示唆しています。

丹羽先生の論文でも、これらの酸浴後の凝集塊は、継代をすると消えてしまうとあります。
細胞特殊部隊は、変革してみたけど、人工培養条件下には乗り切れず消えてしまうようです。

もちろん、生体内では、何らかの活動開始できる能力があるように装備されていたはずの細胞でしょう。
つまり、生体内に準備されている胎児組織由来細胞について、前記事で紹介しましたが、ここでSTAPとつながってくるのです。
生体内には、危機時に生き残る細胞がいます。
つまり、STAP細胞研究においても、胚盤胞注入の生体内条件と、人工培地条件の違いを考慮にいれて、STAP細胞の存在性を考えていく必要があります。


To examine the proportion of the cells expressing Oct3/4 in the aggregates, we next applied immuno-staining using a specific antibody against Oct3/4 we raised and assessed previously15. Cell aggregates derived from low-PH treated liver cells were fixed, stained by anti-Oct3/4 antibody, and observed using confocal microscopy. We stained morula-stage mouse embryos as positive controls. By comparison with these positive controls, we found that some of the cell aggregates contained cells expressing Oct3/4 at comparable levels (Fig. 4a). In the case of cell aggregates derived from liver cells treated by ATP, 20% of cell aggregates contained Oct3/4-positive cells (Fig. 4b), which is consistent to the proportion of cell aggregates expressing the amounts of Oct3/4 comparable to ES cells detected by QPCR (Fig. 3c). In contrast, cell aggregates derived from liver cells treated by HCl included Oct3/4-positive cells at a frequency comparable to that of non-treated cells. The presence of Oct3/4-positive cells in the cell aggregates found only 1 in 14 cases in cultures of non-treated liver cells suggests that such cells are derived from Oct3/4-positive cells present in the liver cell population, that in vitro culture may itself be a source of the stress to the cells, or that the immuno-staining technique may produce some non-specific signal. In cell aggregates derived from ATP-treated liver cells, the Oct3/4-positive cells were typically positioned in the center of the cell aggregates and exhibit large nuclei, and were surrounded by Oct3/4-negative cells with small nuclei at the peripheries of the cell aggregates (Fig. 4c).



また、STAP事件当時、大騒ぎになった青フィルター、赤フィルターについては、 生後6日の GOF Tg mice由来肝細胞のATP処理後(酸浴)には、青フィルター、赤フィルターでともに陽性となりました。
多くの致死の細胞を含む凝集塊では、赤フィルター陽性は当然でしょうが、この凝集塊をさらに続けて7日間培養すると、凝集塊は、OctのmRNAが発現していました。



ATP(酸性液)で処理した肝細胞のOct3/4 蛋白遺伝子発現陽性細胞を証明するために、丹羽先生は工夫をしました。
全体細胞から抽出したRNAでは、Oct3/4 蛋白遺伝子発現の検出は難しかったのですが、細胞凝集塊それぞれからRNAを抽出することで、以下の図のように酸浴後細胞凝集塊ごとのOct3/4 蛋白遺伝子発現を証明したのです。
ES並み(10% 以上)のOct3/4 が、ATP処理後肝細胞凝集塊の19% で見られました。


丹羽論文mRNAの発現

上記図の説明文は以下です。

We next performed qPCR on individual cell aggregates isolated from culture. Aggregates were selected and RNA samples were prepared separately. These RNAs were reverse-transcribed and qPCR was performed. We found that some aggregates expressed a comparable amount—more than 10% of the expression level in ES cells—of pluripotency-associated genes, including Oct3/4 (Fig. 3b). Since the cell aggregates consist of ~10 cells, such expression level indicated possible existence of the cell(s) expressing pluripotency-associated genes at the equivalent level to that in ES cells. Klf4 expression was detected in all samples, which may reflect its expression in liver cells, and thus serves as a positive control in this assay. Of cell aggregates derived from liver cells treated with ATP, 19% expressed the amount of Oct3/4 comparable to ES cells (Fig. 3c). These data suggest that some proportion of cells in the aggregates express pluripotency-associated genes at comparable levels to those of ES cells.


研究者は、まだ答えの無い問題を、あれこれれ試行錯誤して探る仕事をする人です。そんなことを考えたこともない人が、専門家ぶって書いてる。ただ、知ってる人でありたいというのが、あそこに集まる人たちの願望のようだ。科学者ではないとの視点が抜けてしまう。

plusさんです。
>「増殖しない理由を他の論文に求めてあれこれ夢想するというのはただの夢想でしかなく、そういう夢想に耽らない人の方が科学的なんですよ」


それにしても、plusさんは自身が科学者になってしまえる人なんだな。科学者たるひとはこうであるべき!なんて、どうして書いちゃうんだろう?plusさんは、なぜ、それをおかしいと思わないのかな?

plusさん、正気になりなさいな。科学者なりきりごっこ、反省しましょう。

会話している体内時計さんも、自身がSTAP論評できる人と錯覚しちゃうんだから、この二人の会話は科学から脱線しっぱなし。それでも、他人にもきいてもらいたい会話なのでしょう。


あちらは、ブログ主からして、どうしようもない。
ため息さんよ、学とみ子のオリジナル文章を変に書き換えるな。論文の真意を理解してないだろ!

消されないよう貼っておきます。


>丹羽氏(文献1)によると、摘出した肝臓から分離した培養肝細胞にストレス(この場合はATP=酸性環境)に晒すとOct3/4 の発現が見られた細胞を中心にした細胞塊が得られた。この細胞塊のOct3/4 の発現量を測定するとES細胞を対照とすると10%を超えるものが複数(19%)あった。細胞塊はOct3/4 の発現した細胞の周りに発現してない細胞が取り巻いていて合計10細胞程度からなるので、10%の意味は1細胞当たりで考えるとES細胞並の量を発現していると思われる。したがって、ストレスに晒すとES細胞並に初期化に関係するOct3/4タンパクが発現する場合があることが明らかとなった。しかし、残念なことにこれらの細胞塊からキメラを作成することはできなかった。


ため息さん、蛋白とmRNAをきちんと分けて考えられるよう、論文を何度もしっかり読みましょう。細胞10個の話も、おかしくない?

ため息さん、科学的思考ができない、論文を読めないというのは、ため息さんの方ですよ。上の文でもあちこち間違ってるけど、ため息さん自身では気付けないから書いちゃうんですよね。ブログ主が間違っても、間違いを指摘できる人もいない。

学とみ子は、そちらの科学は間違っているから注意をしているだけです。

評論家や科学者になったつもりの錯覚はやめなさいとの学とみ子の主張は、極めて率直なる忠告です。

人は本当の事を言われると辛いと思いますよ。科学者になりたいplusさんは科学者ではないからね。plusさんは、ありったけの悪口をはいてるけど、plusさんの弱点がミエミエです。


いづれにしろ、学とみ子の書いたものをデタラメに書き換えるのは止めなさい!



plusさんです。

>べつに科学者になんてなりたくありませんなあ。

plusさん自らで認めるかどうかは関係ありません。plusさんは科学者なりきりの錯覚になっていると、学とみ子が感じると言うことです。
plusさんは、自らの評価が全てで、自論だけに価値を見出す人です。その自論には何の根拠もありません。
「俺はこう思う」 の世界観です。
誰も理解できなくても、何か解説したふりで自己満足なんですね。

根拠に基づいてものを言うトレーニングもできていません。
知らない話題は、新たなplus論を作ります。
これでは評論はできません。
意見を言う前に、緻密に背景を調べることなど、やってこないplus人生だったでしょう。

STAP批判する限り、plus自論をため息ブログでぶちまければ、聞いてくれる人がいます。
ES捏造論者が集まるそちらはplusさんに居心地がいいでしょう。
小保方犯行説を維持したい学術層にとっては、こうした自論がすべての一般人を抱え込んでおくというのは、大事な戦略なのでしょうね。
結果、ため息ブログは、科学からどんどんかけ離れた存在になっていきますね。


結局、STAP細胞があるのか?ないのか?ではなく、
小保方単独犯行説を維持したい人はどういう人たちなのか?
それを否定したい人たちはどういう人たちなのか?
という局面になっていきます。
この両者の対立の謎は、これからも一般人の興味をつないでいくことになるでしょうね。

小保方単独犯行説を維持したい人とは、
新しい科学的展望を出さない!
論文読まない!論文引用できない!
口汚く他人の悪口ばかりを言っている!
個人情報暴露する!
と今のため息ブログの状態です。

ここまで、悪口攻撃に頑張るため息ブログに接し、一般人がSTAP事件に再度、興味を感じるでしょう。
一般人は、STAP事件の背景を知りたいと思うでしょう。

そして、今のため息ブログの状況を見た一般人は、ESねつ造説にネガティブな印象を持つのは間違いないでしょうね。
彼らの悪口は、人格攻撃に及び、実生活に及ばせてネット違反をし、本当に迫力がありますからね。

ため息ブログ主、plusさんも、体内時計さんも、ハンニバルさんも、Dさんも、思いのたけを書いているのだろうけど、結局、ESねつ造派のマイナスのイメージしか、一般人に与えていないと思います。