| 真核性システムのドキシサイクリン依存的な光活性化された遺伝子形質発現 「条件つきの遺伝子形質発現の高い時空間解像度は、全部の組織または生物において成し遂げるのが典型的に困難である。我々は阻害されて可逆的に2を総合した。そして、導入遺伝子の正確な時空間光に制御された活性化のための異なる膜透過性による光励起性（『ケージ化』）ドキシサイクリン誘導体が『ティートン川』システムに基づいた。ケージ化ドキシサイクリンまたはケージ化シアノであるドキシサイクリンによる潜伏の後、我々は紫外線による局所被曝によって、または、マウスを含む多様な生物系で器官型脳培養を解放していて、マウス胚とツメガエル・オタマジャクシを発育させている2-光子によって遺伝子形質発現を誘発した。我々が毒性の痕跡を見つけなかったので、誘導のために必要とされる紫外線の量は無害だった。この方法は異なる空間尺度でハイレゾリューション条件つきの導入遺伝子発現を許す。そして、単細胞から全ての複合生物にわたる。」 Doxycycline-dependent photoactivated gene expression in eukaryotic systems. High spatial and temporal resolution of conditional gene expression is typically difficult to achieve in whole tissues or organisms . We synthesized two reversibly inhibited, photoactivatable ('caged') doxycycline derivatives with different membrane permeabilities for precise spatial and temporal light-controlled activation of transgenes based on the 'Tet-on' system . After incubation with caged doxycycline or caged cyanodoxycycline, we induced gene expression by local irradiation with UV light or by two-photon uncaging in diverse biological systems, including mouse organotypic brain cultures, developing mouse embryos and Xenopus laevis tadpoles . The amount of UV light needed for induction was harmless as we detected no signs of toxicity . This method allows high-resolution conditional transgene expression at different spatial scales, ranging from single cells to entire complex organisms . Reference: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/, PMID:19503080 |