ついに6月。今週すべてのマウスワークを済ませるつもりですが、そううまくいくかな。今日の分離した前駆細胞のペレットは10μlもなく、これをWesternで使用して、前駆細胞6サンプルで3つの蛋白の発現を比較しないといけません。ここのFilm現像の感度がすごい低いため、不可能のラインに限りなく近いんですが、これが最も重要なFigureになります。RNAの結果はあるんですが、やっぱり蛋白でびしっと示したいんですね。分離した細胞の染色や組織の染色は抗体を文献をもとに3回くらい買い直して、無限にtryしましたが、だめで1年くらいであきらめました。唯一の蛋白で示す方法はWesternです。頼むー。
今日は前駆細胞分離+qRT-PCR、細胞いじり、CTCのゲノム抽出→PCR→シークエンス用gel extractionまでいけるかなどうかな。あとは、プラスミドワークの問題点をよーく見直して、それっぽい問題点をみつけましたが、解決法がいまいちわかりませんので、Y先生にメールです。明日また遠征か。
とにかくだいぶ主張点と必要なデータがまとまってきましたので、プラスミドワークであとワンプッシュしたいところです。3つの論文すべてのFigureに導入する遺伝子を変えてこの共培養を使った方法が使えますので、なんとしてもIP実験まで!
5月論文進捗
ピッツ1:アクセプト
ピッツ2:Reject→昨日再投稿
ピッツ3・肝再生&細胞分離&ダイセクション:中国人ねーちゃんをFirstにする論文。1/3くらい書いたか?
ピッツメイン・胆管前駆細胞主役:Figureの手直しばかり。まったく字書いてない。
ピッツサブ・マクロファージ主役:同じく。
ピッツ5・Hepatocyte前駆細胞主役:今週の結果が期待通りであれば、論文のラインは超えそう。実験大好きアメリカ人ねーちゃんをFirstにして、残された時間で道筋を指導がベスト。ChIP-seqに最高のモデルなんだけど・・・。
ピッツ6・CTC:vivoの結果が得られるかどうかが、火曜日のシークエンスの結果でわかる。getなら、続きのhuman sampleを日本で。ここではvitro・vivoが限界。
日本実験Review:Reject→手直し中。
Book chapter→2ヶ月以上音沙汰なし。
今日は前駆細胞分離+qRT-PCR、細胞いじり、CTCのゲノム抽出→PCR→シークエンス用gel extractionまでいけるかなどうかな。あとは、プラスミドワークの問題点をよーく見直して、それっぽい問題点をみつけましたが、解決法がいまいちわかりませんので、Y先生にメールです。明日また遠征か。
とにかくだいぶ主張点と必要なデータがまとまってきましたので、プラスミドワークであとワンプッシュしたいところです。3つの論文すべてのFigureに導入する遺伝子を変えてこの共培養を使った方法が使えますので、なんとしてもIP実験まで!
5月論文進捗
ピッツ1:アクセプト
ピッツ2:Reject→昨日再投稿
ピッツ3・肝再生&細胞分離&ダイセクション:中国人ねーちゃんをFirstにする論文。1/3くらい書いたか?
ピッツメイン・胆管前駆細胞主役:Figureの手直しばかり。まったく字書いてない。
ピッツサブ・マクロファージ主役:同じく。
ピッツ5・Hepatocyte前駆細胞主役:今週の結果が期待通りであれば、論文のラインは超えそう。実験大好きアメリカ人ねーちゃんをFirstにして、残された時間で道筋を指導がベスト。ChIP-seqに最高のモデルなんだけど・・・。
ピッツ6・CTC:vivoの結果が得られるかどうかが、火曜日のシークエンスの結果でわかる。getなら、続きのhuman sampleを日本で。ここではvitro・vivoが限界。
日本実験Review:Reject→手直し中。
Book chapter→2ヶ月以上音沙汰なし。