安定株失敗・・

コントロールプラスミドができて、ようやくselectionがおちついてきたため、先に作った目的遺伝子のselection後の細胞と発現を比較すると、できておらず・・・はい安定株作戦失敗ちーんです。GFPを搭載してますが、蛍光顕微鏡で10cm dishがみれないという致命的な欠陥がひそんでいて、これまで確認してきませんでした。

一過性発現の実験にもっていくしかないな。tube formationとcolony formationが示せればそれでOKです。短いタイムコースにもちこむしかない。来週再来週で終わらせたいところです。

最初の3つの載せ換えプラスミドのシークエンス提出しましたので、頼むできててくれ～。Publishに必要な最低限の実験はこれらでOKです。昨日注文した4つのプラスミドを含めて、これらはすべて一連のファミリーで、あくまで最終Figureを飾るための大事なおまけです。クローニング・プラスミド載せ換え・coculture・TOP-FLASH・・・・。全く同じことをすべての遺伝子で・・うーん、終わるかな。