今日は予定通り、昨日やったPCRの結果確認からスタート。はっきりとsingle bandが観察できたので、どうやら今回はうまくいったようだ。というわけでようやく次のステップに進めそうだ。最初のPCRを成功させるまでなんだかんだで一週間以上かかってしまった。。。。。思ったより時間がかかるなぁ。
次は、PCR反応物をpurifyした後、double digestion。このサンプルについてはとりあえず今日はここまで。来週mentorとdiscussしてから先に進むことになるだろう。
並行して進めているsequenceの方もここまでは順調。昨日ligationしたサンプルをtransformして一晩incubation。明日確認して上手くコロニーができていればそのままminiprepに進めそうだ。このまま順調に進めば来週中には目的のfusion proteinが得られるかも知れない。その後はうちのラボにある化合物のライブラリーを使ってスクリーニングをするだけなので、結果を得るまでにそれほど時間はかからないはず。今回の実験では６つのtranscriptional activation domainを用意する予定なのだが、スクリーニングに用いる化合物がヒットしなかったら成果ゼロってことになってしまう。夏のローテーションはあまり時間がないから、一つでも結果が欲しいところだ。
余談だが、うちの大学にはenzyme storeなるものがあって上記のPCRやそれ以外の生物系実験で使う酵素etcが常備されている。化学科の建物内にはないので少し歩かないといけないのだが、それぞれ業者に注文して持ってきてもらうよりは、はるかに楽である。夕方まで開いているので、日中にその日必要なものを確認しておけば、試薬がなくて実験が進まないと言う状況にはならない。非常に効率が良い。
明日は土曜日だけど、今日やったtransformationの結果を確認して少し作業をしなければいけないので学校に行くことになりそうだ。