ペプチドは、免疫機能のシグナル伝達、細胞分泌、前駆体シグナル、疾患の発生および治療において多大な研究および応用価値を示しています。ペプチドの構造と機能を研究する過程において、ペプチドの決定、特に長鎖ペプチドの構造決定は非常に重要かつ複雑な作業です。ペプチドの構造を確認するには、高純度で単一成分のペプチドが必須条件です。
現在、ペプチドの決定には主に構造 (アミノ酸組成とペプチドの含有量) の決定とペプチド配列 (アミノ酸の結合配列) の決定が含まれます。Omizzurは現在、次の試験レポートを提供できます。
HPLC とそのカップリング技術 | オミズル
高速液体クロマトグラフィーは、ほぼすべての有機化合物、高分子ポリマー、生体サンプルの分析に広く使用されています。 現在、既知の化合物の 80% 以上を HPLC で分析する必要があります。
近年、生物工学および生命科学の急速な発展に伴い、ペプチド定量に対する要求がさらに高まっています。 Omizzur Peptide は、マイクロカラム HPLC、多次元 HPLC、LC-ESI-MS テクノロジーを使用して、タンパク質とペプチドの同定と分析のための強力なツールを提供しました。
√ 感度の向上: 原子吸光分光法(AAS)、原子蛍光分光法(AFS)、ICP-MS、ICP-AESと組み合わせて、主に形態解析に使用
√ 質量分析と組み合わせることで、分離と構造決定の要件を同時に満たすことができます。
√ タンデムクロマトグラフィーと呼ばれる高速液体クロマトグラフィーと組み合わせて分解能を高めます。
√ NMRと組み合わせて構造を決定
ペプチド分析法
CE(キャピラリー電気泳動)とそのカップリング技術
高圧電場を駆動力として、キャピラリーを分離流路として用い、試料中の成分間の移動度や分布挙動の違いにより成分分離を行う液相分離技術です。
キャピラリー電気泳動とレーザー誘起蛍光検出器(LIFD)の組み合わせは、タンパク質およびペプチドサンプルの高速かつ高感度な検出方法を提供します。低い検出感度によって引き起こされるボトルネックを打破し、分析感度を桁違いに示します。 キャピラリー電気泳動は高速かつ高感度であり、サンプルの定性分析、定量分析、分離および精製に使用できます。
現在、Omizzur Peptide で使用されているキャピラリー検出器は、LIFD、紫外線、蛍光、質量分析計検出器です。 CE は、ペプチドとタンパク質の分離と特性評価に役立つツールです。
MS(質量分析)とその連携技術
質量分析は感度と迅速性が高く、特にペプチド分析に適しています。近年、エレクトロスプレーイオン化(ESI-MS)とマトリックス支援レーザー脱離(MALDI)という2種類のソフトイオン化技術の開発により、タンパク質構造解析における質量分析技術の応用は大きく飛躍しました。
これら 2 つの分析技術により、極性ペプチド分子の分析が可能になります。 検出限界は fmol レベルまで低下しており、分子量の範囲は 100,000Da まで測定できます。 同時に、生体高分子の揮発やガス化が困難であるという問題も解決されます。
エレクトロスプレー質量分析 (ESI-MS) は、最も広く使用されているソフト イオン化技術です。 ESI イオン源は主にイオン性極性化合物に適用できます。 複数の電荷を持つカチオンまたはアニオンを生成できるため、質量電荷比が大幅に低下します (
m/z これらの利点により、極性が大きく比較的高品質のペプチド薬物の検出により適しています。
NMR (核磁気共鳴)
核磁気共鳴（NMR）は化学物質の構造や反応性能の解析に広く利用されており、分子生物学における重要な実験技術として発展しました。
NMR は主にペプチドの微小な物理的および化学的特性を検証するために使用されます。 X線結晶構造解析では検出できない一部のペプチドを検出できます。2D、3Dおよび4D NMRの応用、分子生物学およびコンピューター処理技術の発展により、NMRは徐々にペプチドおよびタンパク質分析の主要な方法の1つになりました。NMRは、アミノ酸配列および定量混合物の成分含有量を決定するために使用でき、30アミノ酸未満を含む短いペプチドの分析に適しています。その他の一般的なペプチド分析方法
・UVスペクトル ・円二色性(CD)
・放射性同位体ラベル ・FD-M
• 赤外線スペクトル • バイオアッセイ
